判断GMP清洗机是否满足清洁要求，需从清洁效果验证、微生物控制、残留物检测、设备合规性、操作记录追溯五个维度建立评估体系，以下是具体检测方法：

一、清洁效果验证

1. ‌目视检查法‌

• 使用强光手电（照度≥1000lux）检查设备内表面

• 合格标准：无可见残留物（如粉末、油渍、结垢）

• 关键区域：焊接缝、死角、管道连接处

2. ‌擦拭取样法‌

• 重量法：干燥后称重，残留量≤0.1mg/cm²

• 紫外分光光度法：检测特定物质吸光度

• 使用无菌棉签擦拭设备表面（接触面积10cm²）

• 溶剂：注射用水（WFI）或异丙醇（根据残留物性质选择）

• 检测方法：

3. ‌TOC检测法‌

• 检测原理：总有机碳分析仪测量清洗水中的碳含量

• 合格限值：≤10ppm（制药行业通用标准）

• 取样点：清洗循环末端的排水口

二、微生物控制检测

1. ‌接触碟法‌

• 打开设备门，暴露30秒

• 压碟取样，培养72小时

• 使用直径55mm的接触碟（TSA培养基）

• 操作步骤：

• 合格标准：菌落数≤10CFU/cm²

2. ‌棉签擦拭法‌

• 擦拭面积：25cm²（5cm×5cm）

• 培养条件：30-35℃培养5-7天

• 检测范围：需氧菌总数、霉菌/酵母菌

3. ‌生物指示剂挑战‌

• 使用嗜热脂肪地芽孢杆菌（ATCC 7953）

• 放置位置：最难清洗区域（如管道弯头）

• 灭菌验证：121℃蒸汽处理30分钟后，所有指示剂应无菌生长

三、残留物检测

1. ‌高效液相色谱法（HPLC）‌

• 检测对象：活性药物成分（API）残留

• 检测限：≤0.001%（相对于下一批次最大日剂量）

• 样品处理：固相萃取（SPE）净化

2. ‌离子色谱法（IC）‌

• 检测对象：清洁剂残留（如阴离子表面活性剂）

• 检测限：≤1ppm

• 柱温：30℃（C18反相柱）

3. ‌pH值检测‌

• 检测点：最终漂洗水

• 合格范围：5.5-7.5（与注射用水一致）

• 检测仪器：校准后的pH计（精度±0.01）

四、设备合规性检查

1. ‌材质验证‌

• 接触部件：316L不锈钢（X射线荧光光谱仪检测）

• 密封件：聚四氟乙烯（FT-IR红外光谱确认）

• 表面粗糙度：Ra≤0.4μm（轮廓仪测量）

2. ‌管道设计验证‌

• 无死角要求：管道内径≥25mm时，坡度≥1%

• 排水能力：3分钟内排空清洗舱

• 防倒灌设计：空气阻断装置（防止清洗液逆流）

3. ‌自动化系统验证‌

• PLC程序：具备权限管理（操作员/管理员分级）

• 数据记录：自动存储清洗参数（温度、压力、时间）

• 报警功能：超限自动停机并记录异常

五、操作记录追溯

1. ‌批记录审核‌

• 必须包含：设备编号、清洗程序、操作人员、验证结果

• 签字要求：操作人、复核人、QA审核人三级签字

• 保存期限：≥产品有效期后1年

2. ‌电子记录系统‌

• 审计追踪功能

• 电子签名

• 数据不可篡改

• 符合21 CFR Part 11要求：

• 备份频率：每日增量备份，每周全量备份

3. ‌年度再验证‌

• 清洁程序：每年至少进行1次全面验证

• 微生物挑战：每2年更换生物指示剂菌株

• 设备改造：重大维修后需重新验证

‌执行建议‌：

1. 建立"三色管理"制度：

• 绿色区（合格）：TOC≤5ppm，菌落数≤5CFU/cm²

• 黄色区（预警）：5ppm＜TOC≤10ppm，5CFU/cm²＜菌落数≤10CFU/cm²

• 红色区（不合格）：TOC＞10ppm，菌落数＞10CFU/cm²

2. 采用风险评估工具：

• 使用FMEA（失效模式与影响分析）确定关键控制点

• 对高风险设备（如无菌灌装线清洗机）实施加强监控

3. 定期参加PDA培训：

• 掌握最新清洁验证指南（如PDA TR29《清洁验证》）

• 学习ISO 15883标准更新内容